Κιτ ανίχνευσης αντισωμάτων ELISA τύπου κυκλοϊού χοίρου
Αριθμός μοντέλου: VD510E
Συντομογραφία:PCV-Ⅱ Ab Elisa
Δείγμα: ορός
Περιγραφή
Προσδιορισμός
PCV-Ⅱ Ab Elisa
Προβλεπόμενη χρήση:
Το κιτ ανίχνευσης αντισωμάτων ELISA τύπου κυκλοϊού χοίρου-Ⅱ είναι για τον προσδιορισμό ειδικού αντισώματος PCV στον ορό χοίρου in vitro. Το τεστ χρησιμοποιείται για την αξιολόγηση των εμβολιασμένων από ανοσοποίηση με εμβόλιο τύπου κυκλοϊού χοίρου-Ⅱ σε χοιροτροφεία.
Δείγμα:ορρός
Παρεχόμενα Υλικά:
Διαδικασίες Δοκιμών & Διερμηνεία
ΒΗΜΑ 1 Διαδικασία δοκιμής
1.1 Παρασκευή διαλύματος πλύσης
Υγρό πλυσίματος με συγκέντρωση εργασίας: Πριν από τη χρήση, το διάλυμα πλύσης πρέπει να αποκατασταθεί σε θερμοκρασία δωματίου (20-25 βαθμούς) και να ανακινηθεί ομοιόμορφα για να γίνει ομοιόμορφο. Στη συνέχεια αραιώστε 20 φορές το συμπυκνωμένο διάλυμα πλύσης με καθαρό νερό (για παράδειγμα, 5 ml πυκνού διαλύματος πλύσης προστίθενται σε 95 ml καθαρού νερού), ανακατέψτε καλά και το αραιωμένο υγρό πλύσης μπορεί να αποθηκευτεί στους 2-8 βαθμούς για 7 ημέρες.
1.2 Προετοιμασία δείγματος
① Λήφθηκε αίμα πλήρους ζώου, φυγοκεντρήθηκε στις 4000 rpm για 10 λεπτά και συλλέχθηκε το υπερκείμενο. Ο ορός μπορεί επίσης να πήξει φυσικά χωρίς αιμόλυση.
② Αραιώστε το δείγμα ορού 1:25 (προσθέστε 5 ul δείγματος ορού σε 120 ul διαλύτη δείγματος) και ανακατέψτε καλά.
Σημείωση: Οι αρνητικοί και οι θετικοί μάρτυρες δεν χρειάζεται να αραιώνονται.
1.3 Ενζυμικό συζυγές Παρασκευή
Αραιώστε το συζυγές ενζύμου 1:25 (προσθέστε 5 ul συζυγούς ενζύμου σε 120 ul ενζυμικού αραιωτικού) και ανακατέψτε καλά.
1.4 Διαδικασία δοκιμής
① Πάρτε την ετικέτα ενζύμου Microplate (ανάλογα με τον αριθμό των δειγμάτων, μπορεί να αποσυναρμολογηθεί και να χρησιμοποιηθεί πολλές φορές), προσθέστε 100 ul του αραιωμένου ορού στην ετικέτα ενζύμου Microplate, ρυθμίστε δύο φρεάτια για αρνητικά και θετικά δείγματα και προσθέστε 100 ul για αρνητικούς και θετικούς μάρτυρες στο πηγαδάκι αντίδρασης αντίστοιχα. Ανακινήστε απαλά το δείγμα στο φρεάτιο, χρησιμοποιώντας το φιλμ της πλάκας σφράγισης για να καλύψει την πλάκα και επωάστε στους 37 βαθμούς για 30 λεπτά.
②Ανοίξτε το φιλμ της πλάκας σφράγισης, ανακινήστε το διάλυμα στο φρεάτιο της πλάκας, προσθέστε 300µl υγρού πλυσίματος με συγκέντρωση εργασίας σε κάθε φρεάτιο και, στη συνέχεια, πετάξτε το υγρό στο φρεάτιο. Επαναλάβετε τα παραπάνω βήματα 5 φορές και τέλος στεγνώστε τα σε καθαρό απορροφητικό χαρτί.
③Προσθέστε 100µl συζεύγματος ενζύμου σε κάθε φρεάτιο, καλύψτε την πλάκα και επωάστε στους 37 βαθμούς για 45 λεπτά.
④ Ανοίξτε το φιλμ της πλάκας σφράγισης, ανακινήστε το διάλυμα στο φρεάτιο της πλάκας, προσθέστε 300 μl υγρού πλυσίματος με συγκέντρωση εργασίας σε κάθε φρεάτιο και, στη συνέχεια, πετάξτε το υγρό στο φρεάτιο. Επαναλάβετε τα παραπάνω βήματα 5 φορές και τέλος στεγνώστε τα σε καθαρό απορροφητικό χαρτί.
⑤Προσθέστε 100µl διαλύματος υποστρώματος σε κάθε φρεάτιο, καλύψτε την πλάκα και επωάστε για 10 λεπτά στους 37 βαθμούς μακριά από το φως.
⑥Προσθέστε 50µl διαλύματος τερματισμού σε κάθε φρεάτιο και προσδιορίστε το αποτέλεσμα μέσα σε 5 λεπτά.
ΒΗΜΑ 2 Ερμηνεία αποτελεσμάτων
Η τιμή OD450 κάθε φρεατίου διαβάστηκε στον αναγνώστη μικροπλάκας 96 φρεατίων.
2.1 Επικύρωση
Η μέση τιμή OD450nm του αρνητικού ελέγχου ήταν<0.1 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥5, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.
2.2 Μέθοδος Υπολογισμού
Για κάθε δείγμα, υπολογίστε το S/P ως εξής χρησιμοποιώντας το διορθωμένο δείγμα και τις τιμές ελέγχου:
S / P=(ODΔΕΙΓΜΑ-ODNC) / (ΟΔΗ/Υ-ODNC)
2.3 Ερμηνεία Αποτελεσμάτων
Όταν S/P<0.15, it is judged as negative.
Όταν S/P Μεγαλύτερο ή ίσο με 0,25, κρίνεται ως θετικό.
Όταν 0,15 μικρότερο ή ίσο με S/P<0.25, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.
Δημοφιλείς Ετικέτες: τύπος κυκλοϊού χοίρου-ⅱ κιτ ανίχνευσης αντισωμάτων elisa, Κίνα τύπου κυκλοϊού χοίρου-ⅱ κιτ ανίχνευσης αντισωμάτων elisa, κατασκευαστές, εργοστάσιο
Ένα ζευγάρι: Anti-ge porcine pseudorabies ιών ιού ELISA κιτ
Επόμενη: Όχι
