ΚΛΕΙΔΙΟ ΚΙΝΗΤΙΚΟ ΕΙΣΑΓΟ

Προσδιορισμός

 

 

Διαδικασίες και ερμηνεία δοκιμών

 

Διαδικασία δοκιμής βήμα 1

1.1 ΠΡΟΣΑΡΤΗΜΑ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΩΝ

Wσυγκέντρωση orking washing υγρό:Πριν από τη χρήση, το διάλυμα πλύσης πρέπει να αποκατασταθεί σε θερμοκρασία δωματίου (20-25 βαθμό) και να κλονιστεί ομοιόμορφα για να το κάνει ομοιόμορφη. Στη συνέχεια αραιώστε 20 φορές το συμπυκνωμένο διάλυμα πλύσης με καθαρισμένο νερό (για παράδειγμα, προστίθεται συμπυκνωμένο διάλυμα πλυσίματος 5ml σε καθαρισμένο νερό 95ml), ανακατεύουμε καλά και το αραιωμένο υγρό πλύσης μπορεί να αποθηκευτεί σε 2-8 βαθμό για 7 ημέρες.

1.2 Προετοιμασία δείγματος

① Το αίμα ολόκληρου των ζώων ελήφθη, φυγοκεντρήθηκε στις 4000rpm για 10 λεπτά και το υπερκείμενο συλλέχθηκε. Ο ορός μπορεί επίσης να πέσει φυσικά χωρίς αιμόλυση.

② αραιώστε τον ορό που θα δοκιμαστεί 10 φορές στην πλάκα αραίωσης ορού (για παράδειγμα: προσθέστε 15UL ορού που θα δοκιμαστεί σε αραιωτικό δείγμα 135UL).

Σημείωση: Οι αρνητικοί και θετικοί μάρτυρες δεν χρειάζεται να αραιωθούν.

1.3 Διαδικασία δοκιμής

① Παρέχετε το μικροπλάνο ετικέτας ενζύμου (σύμφωνα με τον αριθμό των δειγμάτων, μπορεί να αποσυναρμολογηθεί και να χρησιμοποιηθεί αρκετές φορές), προσθέστε 100UL του αραιωμένου ορού στο μικροπλικό της ετικέτας ενζύμου, ρυθμίστε δύο φρεάτια για αρνητικό έλεγχο και θετικό έλεγχο και προσθέστε το 100ul στο The the αντίδραση καλά αντίστοιχα. Ανακινήστε απαλά το δείγμα στο φρεάτιο, χρησιμοποιώντας την μεμβράνη πλάκας σφράγισης για να καλύψετε την πλάκα και να επωφεληθείτε σε 37 βαθμούς για 30 λεπτά.

Ανοίξτε την μεμβράνη πλάκας στεγανοποίησης, αποβάλλετε το διάλυμα στην πλάκα καλά, προσθέστε 300μL υγρού πλύσης συγκέντρωσης εργασίας σε κάθε φρεάτιο και στη συνέχεια απορρίψτε το υγρό στο πηγάδι. Επαναλάβετε τα παραπάνω βήματα 5 φορές και τελικά στεγνώστε σε καθαρό απορροφητικό χαρτί.

③add 100μL συζευγμένου ενζύμου σε κάθε πηγάδι, καλύψτε την πλάκα και επωάστε σε 37 βαθμούς για 30 λεπτά.

Ανοίξτε την μεμβράνη πλάκας στεγανοποίησης, απομακρύνετε το διάλυμα στην πλάκα καλά, προσθέστε 300μL υγρού πλύσης συγκέντρωσης εργασίας σε κάθε φρεάτιο και στη συνέχεια απορρίψτε το υγρό στο πηγάδι. Επαναλάβετε τα παραπάνω βήματα 5 φορές και τελικά στεγνώστε σε καθαρό απορροφητικό χαρτί.

⑤add διάλυμα υποστρώματος 100μL σε κάθε φρεάτιο, καλύψτε την πλάκα και επωάστε για 10 λεπτά σε 37 μοίρες μακριά από το φως.

⑥add 50μL Διακοπή διαλύματος σε κάθε φρεάτιο και καθορίστε το αποτέλεσμα εντός 5 λεπτών.

 

Βήμα 2 Ερμηνεία αποτελεσμάτων

Η τιμή OD450 κάθε φρεατίου διαβάστηκε στο 96- καλά microplate Reader.

2.1 επικύρωση

Η μέση τιμή OD45 0 nm του αρνητικού ελέγχου ήταν <0. Διαφορετικά, η δοκιμή πρέπει να επαναληφθεί.

2.2 Μέθοδος υπολογισμού

Για κάθε δείγμα, υπολογίστε το S/ P ως εξής χρησιμοποιώντας το διορθωμένο δείγμα και τις τιμές ελέγχου:

2.3 Ερμηνεία αποτελεσμάτων

Όταν S/p <0. 2, κρίνεται ως αρνητικό.

Όταν S/P> 0. 3, κρίνεται ως θετικό.

Όταν {{0}}.

 

Δημοφιλείς Ετικέτες: Classic Swine Fever Virus the alus elisa κιτ, China Classic Swine Fever Virs thers elus elisa kit προμηθευτές, κατασκευαστές, εργοστάσιο