Κιτ ELISA elisa ιού ιού

Προσδιορισμός

Prrsv ab elisa

Προβλεπόμενη χρήση: Το αναπαραγωγικό και το αναπνευστικό χοίρο

Το κιτ ανίχνευσης ELISA του ιού του συνδρόμου είναι για τον προσδιορισμό συγκεκριμένου αντισώματος PRRSV στον ορό του χοίρου in vitro. Η δοκιμή χρησιμοποιείται για την αξιολόγηση του εμβολιασμού από

Ανοσοποίηση με αναπαραγωγική χοίρων και

Το εμβόλιο του ιού του αναπνευστικού συνδρόμου των αγροκτήματος χοίρων.

Δείγμα: ορός

Παρέχονται υλικά:

Διαδικασίες και ερμηνεία δοκιμών

Διαδικασία δοκιμής βήμα 1

1.1 ΠΡΟΣΑΡΤΗΜΑ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΩΝ

Wσυγκέντρωση orking washing υγρό:Πριν από τη χρήση, το διάλυμα πλύσης πρέπει να αποκατασταθεί σε θερμοκρασία δωματίου (20-25 βαθμό) και να κλονιστεί ομοιόμορφα για να το κάνει ομοιόμορφη. Στη συνέχεια αραιώστε 20 φορές το συμπυκνωμένο διάλυμα πλύσης με καθαρισμένο νερό (για παράδειγμα, προστίθεται συμπυκνωμένο διάλυμα πλυσίματος 5ml σε καθαρισμένο νερό 95ml), ανακατεύουμε καλά και το αραιωμένο υγρό πλύσης μπορεί να αποθηκευτεί σε 2-8 βαθμό για 7 ημέρες.

1.2 Προετοιμασία δείγματος

① Το αίμα ολόκληρου των ζώων ελήφθη, φυγοκεντρήθηκε στις 4000rpm για 10 λεπτά και το υπερκείμενο συλλέχθηκε. Ο ορός μπορεί επίσης να πέσει φυσικά χωρίς αιμόλυση.

② αραιώστε το δείγμα ορού 1:50 (προσθέστε το δείγμα ορού 3UL σε αραιωτικό δείγμα 147UL) και ανακατέψτε καλά.

Σημείωση: Οι αρνητικοί και θετικοί έλεγχοι χρειάζονται επίσης αραιά.

1.3 Διαδικασία δοκιμής

① Παρέχετε το μικροπλάνο ετικέτας ενζύμου (σύμφωνα με τον αριθμό των δειγμάτων, μπορεί να αποσυναρμολογηθεί και να χρησιμοποιηθεί αρκετές φορές), προσθέστε 100UL του αραιωμένου ορού στο μικροπλικό της ετικέτας ενζύμου, ρυθμίστε δύο φρεάτια για αρνητικά και θετικά δείγματα και προσθέστε 100UL για αρνητικά για αρνητικά και θετικούς ελέγχους στην αντίδραση αντιστοίχως αντίστοιχα. Ανακινήστε απαλά το δείγμα στο φρεάτιο, χρησιμοποιώντας την μεμβράνη πλάκας σφράγισης για να καλύψετε την πλάκα και να επωφεληθείτε σε 37 βαθμούς για 30 λεπτά.

Ανοίξτε την μεμβράνη πλάκας στεγανοποίησης, αποβάλλετε το διάλυμα στην πλάκα καλά, προσθέστε 300μL υγρού πλύσης συγκέντρωσης εργασίας σε κάθε φρεάτιο και στη συνέχεια απορρίψτε το υγρό στο πηγάδι. Επαναλάβετε τα παραπάνω βήματα 5 φορές και τελικά στεγνώστε σε καθαρό απορροφητικό χαρτί.

③add 100μL συζευγμένου ενζύμου σε κάθε πηγάδι, καλύψτε την πλάκα και επωάστε σε 37 μοίρες για 45 λεπτά.

Ανοίξτε την μεμβράνη πλάκας στεγανοποίησης, απομακρύνετε το διάλυμα στην πλάκα καλά, προσθέστε 300μL υγρού πλύσης συγκέντρωσης εργασίας σε κάθε φρεάτιο και στη συνέχεια απορρίψτε το υγρό στο πηγάδι. Επαναλάβετε τα παραπάνω βήματα 5 φορές και τελικά στεγνώστε σε καθαρό απορροφητικό χαρτί.

⑤add διάλυμα υποστρώματος 100μL σε κάθε φρεάτιο, καλύψτε την πλάκα και επωάστε για 10 λεπτά σε 37 μοίρες μακριά από το φως.

⑥add 50μL Διακοπή διαλύματος σε κάθε φρεάτιο και καθορίστε το αποτέλεσμα εντός 5 λεπτών.

Βήμα 2 Ερμηνεία αποτελεσμάτων

Η τιμή OD450 κάθε φρεατίου διαβάστηκε στο 96- καλά microplate Reader.

2.1 επικύρωση

Η μέση τιμή OD450NM του αρνητικού ελέγχου ήταν<0.1 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 Μέθοδος υπολογισμού

Για κάθε δείγμα, υπολογίστε το S/P ως εξής χρησιμοποιώντας το διορθωμένο δείγμα και τις τιμές ελέγχου:

2.3 Ερμηνεία αποτελεσμάτων

Πότε S/P<0.46, it is judged as negative.

Όταν S/P μεγαλύτερο από ή ίσο με 0. 56, κρίνεται ως θετικό.

Όταν 0. 46 λιγότερο από ή ίσο με s/p<0.56, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

Δημοφιλείς Ετικέτες: Παρέμβια αναπαραγωγικού και αναπνευστικού συνδρόμου Αντισώματος ELISA Kit, Κίνας Προμηθευτών Αναπαραγωγικού και Αναπνευστικού Συνδρόμου Αντισώματος Προμηθειών ELISA, Κατασκευαστές, Εργοστασίου, Factory